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內(nèi)皮細(xì)胞位于血管內(nèi)腔表面，形成一層連續(xù)的單層細(xì)胞屏障。它們不僅在物質(zhì)交換和血管通透性控制中發(fā)揮關(guān)鍵作用，還參與血管張力調(diào)節(jié)、血液凝固、炎癥反應(yīng)以及血管新生等過(guò)程。因此，內(nèi)皮細(xì)胞廣泛用于血栓形成、動(dòng)脈粥樣硬化、炎癥、腫瘤血管生成等疾病機(jī)制的研究。
平滑肌細(xì)胞位于內(nèi)皮細(xì)胞下方的中層，主要功能是通過(guò)收縮與舒張調(diào)節(jié)血管管腔直徑，從而控制血壓和血流分布。平滑肌細(xì)胞在高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈瘤、支氣管哮喘、肺動(dòng)脈高壓等疾病研究中廣泛應(yīng)用。
大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒，英文名稱：Mouse Bone Marrow-Derived Macrophage Cells Isolation and Culture Kit；是普諾賽專為大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞研發(fā)，試劑盒內(nèi)含大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離與提取所需的全套核心組分，并附帶詳細(xì)的操作說(shuō)明書(shū)，開(kāi)盒即用，方便高效。
使用普諾賽®大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒獲取的細(xì)胞具有高純度、高活率以及典型的形態(tài)學(xué)特征，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定，貼壁生長(zhǎng)良好，適用于各類后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作，具備良好的實(shí)驗(yàn)重復(fù)性與一致性
使用普諾賽®血管類原代細(xì)胞提取試劑盒分離獲得的細(xì)胞貼壁性良好，狀態(tài)穩(wěn)定，具備典型的形態(tài)學(xué)特征。經(jīng)免疫熒光檢測(cè)證實(shí)，細(xì)胞特異性標(biāo)志物呈陽(yáng)性表達(dá)，細(xì)胞純度可達(dá)90%。該試劑盒分離的細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性和結(jié)果一致性良好，適用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。
試劑盒組分及用途簡(jiǎn)述
清洗液：用于清洗血管組織，有效維持組織和細(xì)胞活性；并具抑菌作用，有助于降低污染風(fēng)險(xiǎn)。
內(nèi)皮細(xì)胞消化液（主動(dòng)脈 / 肺大動(dòng)脈）：對(duì)血管組織的內(nèi)膜面進(jìn)行消化，高效解離組織結(jié)構(gòu)，獲得內(nèi)皮細(xì)胞懸液。
平滑肌細(xì)胞消化液：對(duì)血管平滑肌層組織進(jìn)行消化解離，可充分解離組織塊，獲得單細(xì)胞懸液。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基與添加劑：提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分，并維持目標(biāo)細(xì)胞的優(yōu)先生長(zhǎng)。
鋪板工作液：促進(jìn)細(xì)胞貼壁，提高細(xì)胞增殖效率。
細(xì)胞濾網(wǎng)：物理過(guò)濾未完-全解離組織碎片和雜質(zhì)，提高目標(biāo)細(xì)胞純度。
血管類細(xì)胞提取與培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題
Q:細(xì)胞純度不足
需徹-底清除血管表面的脂肪與結(jié)締組織；分離平滑肌細(xì)胞時(shí)，應(yīng)盡可能剝離外膜層和內(nèi)膜層組織；消化內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制消化時(shí)間及組織塊大?。▍⒖颊f(shuō)明書(shū)組織塊大?。?，避免因過(guò)度消化而降低細(xì)胞純度。
Q:細(xì)胞得量少/活率低
細(xì)胞得率不足可能是因組織消化不充分，應(yīng)確保消化液配制和保存符合說(shuō)明書(shū)要求，并嚴(yán)格控制消化時(shí)間。
細(xì)胞活率低常見(jiàn)于消化過(guò)度，建議在吹打組織時(shí)操作輕柔，適時(shí)終止消化過(guò)程；取材過(guò)程中應(yīng)快速操作，現(xiàn)取現(xiàn)用，并始終保持組織低溫以減少細(xì)胞損傷。
Q:內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)傳代要點(diǎn)
內(nèi)皮細(xì)胞相對(duì)較為脆弱，傳代次數(shù)有限，生長(zhǎng)速度慢。初期培養(yǎng)3天內(nèi)細(xì)胞貼壁緩慢是正常現(xiàn)象。可通過(guò)離心換液后接回原皿即可。傳代需在細(xì)胞匯合度達(dá)到80%以上，按1:2比例傳代處理，并優(yōu)先使用Accutase消化液進(jìn)行消化；若無(wú)Accutase酶，可使用0.25%含EDTA的胰酶進(jìn)行消化，嚴(yán)格控制好消化時(shí)間。
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