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THP-1細胞吞噬功能驗證:乳膠顆粒與紅細胞實驗

更新時間:2025-08-18  |  點擊率:686

THP-1細胞(別名:THP-1(ATCC)、Tohoku Hospital Pediatrics-1等)是一種源自人急性單核細胞白血病的小鼠單核細胞系,具有典型的單核細胞/巨噬細胞特性。作為懸浮生長的腫瘤細胞,THP-1廣泛用于免疫調(diào)控、炎癥反應、吞噬功能及單核細胞分化研究,是免疫學與腫瘤學領域的基礎實驗模型。

核心特性

種屬:人(Homo sapiens)
組織來源:急性單核細胞白血??;單核細胞起源
生長特性:懸浮生長,需離心收集(禁止直接傾倒培養(yǎng)液)
細胞形態(tài):圓形或橢圓形單核細胞,大小均一
生物安全等級:BSL-1(常規(guī)實驗室安全操作)

培養(yǎng)方案

培養(yǎng)基配方

  • 基礎培養(yǎng)基:RPMI-1640([PM150110])

  • 添加物: 

    • 10% FBS([164210])

    • 0.05 mM β-巰基乙醇(關鍵成分,維持細胞活性)

    • 1% 雙抗(青霉素-鏈霉素,[PB180120])

  • 無需額外成分:配方完整,直接使用

培養(yǎng)條件

  • 氣體環(huán)境:空氣(95%)+ CO?(5%)

  • 溫度:37℃

  • 推薦傳代密度:5×10? – 1×10? cells/mL

  • 換液頻率:每2-3天更換半量培養(yǎng)基(懸浮細胞無需消化)

關鍵注意事項

  1. 懸浮細胞操作: 

    • 傳代或換液時需低速離心(800-1000 rpm,5 min)收集細胞,禁止直接傾倒培養(yǎng)液。

    • 復蘇后需靜置1-2小時,待細胞沉降后再輕柔混勻。

  2. β-巰基乙醇必要性:該成分對THP-1活性至關重要,不可省略。

  3. 密度監(jiān)控:細胞密度超過1×10? cells/mL時需及時分瓶,避免營養(yǎng)耗竭。

  4. 凍存與復蘇: 

    • 凍存液:無血清非程序凍存液([PB180438]),無需緩慢降溫,直接-80℃過渡后轉(zhuǎn)入液氮。

    • 復蘇要點:快速融化(37℃水?。?,離心去除凍存液后重懸。

生物學功能與應用場景

  • 吞噬與抗原呈遞:可吞噬乳膠顆粒、酵母聚糖及調(diào)理過的紅細胞,適用于吞噬功能研究。

  • 分化誘導:佛波醇酯(PMA/TPA)可誘導THP-1分化為巨噬細胞樣表型,用于炎癥模型構(gòu)建。

  • 免疫調(diào)控研究:表達補體C3受體與Fc受體,適用于抗體依賴性細胞毒性(ADCC)研究。

  • 疾病模型:模擬單核細胞在白血病、動脈粥樣硬化等疾病中的行為。

背景與來源

  • 細胞起源:從1歲男性急性單核細胞白血病患兒外周血中分離建立,表面無免疫球蛋白表達。

  • 功能驗證:XC斑點形成試驗陰性,無病毒顆粒分泌。

  • 保藏信息:ATCC(TIB-202)、DSMZ(ACC-16)、ECACC(88081201)權(quán)-威機構(gòu)保藏。

推薦操作流程

  1. 傳代步驟: 

    • 收集細胞懸液,800-1000 rpm離心5 min,棄上清。

    • 加入新鮮培養(yǎng)基重懸,按1:2-1:4比例分瓶。

  2. 凍存技巧: 

    • 收集對數(shù)期細胞,離心后用預冷凍存液重懸,直接-80℃保存24小時后轉(zhuǎn)入液氮。

  3. 計數(shù)與接種: 

    • 使用血球計數(shù)板或自動細胞計數(shù)儀,維持密度在5×10? – 1×10? cells/mL。

THP-1細胞以其穩(wěn)定的懸浮生長特性與明確的巨噬細胞分化潛能,成為免疫與腫瘤研究中的核心工具。嚴格遵循離心收集與β-巰基乙醇添加要求,可最大限度維持細胞功能與實驗可重復性。


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